炎症性肠炎（Inflammatory Bowel Disease, IBD）是一组慢性、复发性肠道炎症性疾病，主要包括溃疡性结肠炎（Ulcerative Colitis, UC）和克罗恩病（Crohn's Disease, CD）。为满足临床前对该疾病的病因、发病机制及新开发药物药效等研究，目前已有多种动物模型被广泛应用，如化学诱导模型，自发性模型，基因改造模型和过继性T细胞转移模型等。其中葡聚糖硫酸钠（Dextran Sulfate Sodium Salt，DSS）诱导的动物模型是使用最广泛的化学诱导IBD模型。DSS可损伤结肠上皮细胞的紧密连接和基底膜，从而增加肠道渗透性，导致肠道菌群和其他抗原进入黏膜下层和体循环，激活免疫炎症反应，诱导结肠炎症状。动物表现出腹痛、腹泻、便血、体重减轻、疲劳等临床症状。优点是操作简单，成功率高，重复性好，其症状和组织学改变均与人类临床溃疡性结肠炎类似，且可以通过给予动物自由饮用不同浓度的DSS水溶液，制成急性和慢性两种结肠炎模型，是研究UC发病机制和药物疗效较为理想的模型。
创模生物在C57BL/6J小鼠上建立了稳定的DSS诱导的IBD疾病模型，可用于溃疡性结肠炎的临床前研究和药效评价。

•  Case：DSS诱导的IBD小鼠疾病模型用于评价环孢菌素A（Ciclosporin A, CsA）的药效

一、预防性给药
造模和药效评价过程：

评价指标：
1、体重
每天一次记录体重变化

2、疾病活动指数（DAI）评分
DAI＝（体重下降分数＋大便性状分数＋便血分数）/3。1）体重下降分数：体重下降百分率（体重不变为0，1-5为1分，5-10为2分，10-20为3分，大于20为4分）；2）大便性状分数：大便黏稠度（正常为0，软便为1分，黏液样便为2分，稀液状便为3分）；3）便血分数：大便出血（正常0分，隐血指示剂浅蓝为1分，隐血指示剂蓝色为2分，隐血指示剂深蓝为3分，肉眼血便为4分）。
DAI可以对小鼠发病情况进行量化分析。每天1次对小鼠进行DAI打分。

3、结肠长度
实验结束时，测量结肠长度。

4、直观肠粘膜损伤（CMDI）评分
实验结束，对小鼠进行CMDI评分。 CMDI评分标准：无损伤为0分；轻度充血，水肿，表面光滑，无糜烂或溃疡为1分；充血水肿，黏膜粗糙呈颗粒状，有糜烂或肠粘连为2分；高度充血水肿，黏膜表面有坏死及溃疡形成，溃疡最大纵径小于1.0cm，肠壁增厚或表面有坏死及炎症为3分；在3分基础上溃疡最大纵径大于1．0 cm或全肠壁坏死为4分。

5、病理检测
实验结束后，摘取结肠组织，进行HE染色，病理检查。

G1 Vehicle 肠粘膜固有层散在少量淋巴细胞，并见少量游离状中性粒细胞。
G5-DSS 肠粘膜局灶溃疡形成，可见炎性渗出物及肉芽组织增生，并见较多炎细胞（其中见较多嗜酸性粒细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、组织细胞等）及淋巴小结。
G3 DSS+CsA 肠粘膜固有层散在少量淋巴细胞，并见少量游离胰腺组织。
总结：实验数据显示，造模组（G2 DSS）相对于未造模组（G1 Vehicle），动物体重有所下降，且DAI和CMDI评分明显升高，Day7检测到结肠长度明显缩短；溃疡形成可见炎性渗出物及肉芽组织增生，有较多炎细胞浸润及淋巴小结。给药组（G3 DSS+CsA）的动物体重变化不明显；DAI和CMDI评分略有升高；Day7检测到结肠长度缩短，但缩短程度小于造模组（G2 DSS）；病理结果显示结肠症状显著缓解，与未造模组（G1-Vehicle）病理结构相似。这表明DSS诱导C57BL/6小鼠炎症性肠炎疾病模型造模成功，CsA预防性治疗方案对DSS诱导C57BL/6小鼠炎症性肠炎疾病模型的临床症状显著缓解。
二、治疗性给药
造模和药效评价过程：

评价指标：
1、体重
每天一次记录体重变化

2、疾病活动指数（DAI）评分
实验结束时，对小鼠进行DAI打分。

3、结肠长度
实验结束时，测量结肠长度。

4、直观肠粘膜损伤（CMDI）评分
实验结束，对小鼠进行CMDI评分。

5、病理检测
实验结束后，摘取结肠组织，进行HE染色，病理检查。

G1 Vehicle 肠粘膜固有层散在少量淋巴细胞，并见少量游离状中性粒细胞。
G4 DSS 肠粘膜局部明显变薄，此区固有层未见大肠腺，可见稍多炎细胞（淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等），另见灶性粘膜缺失，此区未见明显炎反应及肉芽组织（考虑为人工假象），另见淋巴小结。
G2 DSS→CsA 肠粘膜局部溃疡形成，可见炎性渗出物及肉芽组织增生，并见大量炎细胞（其中见大量中性粒细胞、淋巴细胞、组织细胞等）及淋巴小结，部分腺上皮示增生性改变，部分腺上皮示低级别上皮内瘤变。
总结：实验数据显示，造模组（G4 DSS）相对于未造模组（G1 Vehicle），动物在造模过程中持续下降，Day7停止DSS刺激后，体重有所恢复；Day13 DAI评分也明显低于Day7；Day13与预防性给药实验中的造模组（G5 DSS）的Day7相比，结肠长度有所增长，CMDI评分略降低（不排除个体差异）；病理结果显示有大量炎细胞浸润，肠粘膜变薄，溃疡形成。给药组（G2 DSS→CsA）的动物体重在造模过程中持续下降，Day7停止DSS刺激并连续给药后，体重有所恢复，恢复程度大于造模组（G4 DSS）；Day13 DAI评分也明显低于Day7，Day13比预防性给药实验中给药组（G3 DSS+CsA）的Day7 结肠长度有所增长，CMDI评分略高；病理结果显示与造相似，但也显示出部分腺上皮增生修复性改变。这表明CsA治疗性给药方案对DSS诱导C57BL/6小鼠炎症性肠炎疾病模型的体重减轻有所缓解，其他临床症状如粪便粘稠度、便血情况、结肠长度和肠粘膜损伤程度，给药组对比造模组没有表现出明显的缓解，两组在Day7~13症状有所缓解主要依赖于停止DSS刺激。
综上所述，CsA在DSS诱导的IBD小鼠疾病模型有一定的药效，但预防性给药效果更好。